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lonza 無血清 培養(yǎng)基　相關鏈接http://bitebo.com/a/gb2312/gongsixinxi/shichanghuodong/2014/0514/5157.html

目的 通過無血清培養(yǎng)法初步富集人結(jié)腸癌Caco-2干細胞，并探討其可行性，以期為Caco-2干細胞的有效分選方法提供一種思路，為結(jié)腸癌的研究構(gòu)建一種新的干細胞模型。耐藥性，行免疫熒光染色檢測結(jié)腸癌干細胞特異性標記物CD133的表達。腫瘤干細胞球，并能連續(xù)傳代，將其重懸于含血清培養(yǎng)基后，能分化成貼壁的單層細胞；Caco-2腫瘤干細胞球可在含血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基的交替培養(yǎng)中發(fā)生相應轉(zhuǎn)化；耐藥實驗顯示一部分Caco-2腫瘤干細胞球來源的單細胞能在添加了化療藥物的無血清培養(yǎng)基中存活并重新增殖成球，無藥物干預組、5-氟尿嘧啶干預組、奧沙利鉑干預組、5-氟尿嘧啶聯(lián)合奧沙利鉑干預組形成的Caco-2腫瘤干細胞球的數(shù)目分別為：（10.0±1.15）個/孔、（16.1±1.52）個/孔、（17.5±1.43）個/孔、（18.8±1.14）個/孔，4組的成球數(shù)都存在統(tǒng)計學差異（P< 0.05）：5-氟尿嘧啶聯(lián)合奧沙利鉑干預組>奧沙利鉑干預組>5-氟尿嘧啶干預組>無藥物干預組；免疫熒光染色顯示Caco-2腫瘤干細胞球呈現(xiàn)橙紅色熒光，即為CD133陽性表達。

　　方法 將人結(jié)腸癌Caco-2細胞接種于無血清培養(yǎng)基中以初步富集Caco-2干細胞，觀察其生長增殖過程，通過含血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基交替培養(yǎng)誘導其分化，利用5-氟尿嘧啶、奧沙利鉑驗證其

　　結(jié)果 一部分Caco-2細胞在無血清培養(yǎng)基中逐漸增殖形成懸浮的

　　結(jié)論 人結(jié)腸癌Caco-2細胞可以在無血清培養(yǎng)基中形成懸浮的腫瘤干細胞球，它具有自我更新、不斷增殖、分化和耐藥的能力，能表達結(jié)腸癌干細胞特異性標記物CD133；無血清培養(yǎng)聯(lián)合化療藥物干預比單純采用無血清培養(yǎng)有利于Caco-2干細胞的富集，奧沙利鉑的富集效率高于5-氟尿嘧啶，二者聯(lián)用的富集效率高于單藥；通過無血清培養(yǎng)法可以初步富集到人結(jié)腸癌Caco-2干細胞的樣細胞。

　?。ㄕ?012中國消化系疾病學術大會論文集）

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