無血清培養(yǎng)基UltraCULTURE Serum-free Medium
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近日，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院普通外科研究人員發(fā)表論文，旨在分選肝癌Bel-7402細(xì)胞中的側(cè)群（SP）細(xì)胞并分析其生物學(xué)特性。研究指出，肝癌Bel-7402細(xì)胞中的SP細(xì)胞可能富集了肝癌干細(xì)胞。該文發(fā)表在2013年第05期《中山大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)科學(xué)版）》雜志上。
采用流式細(xì)胞熒光激活分選（FACS）技術(shù)將Bel-7402細(xì)胞分為SP細(xì)胞和非側(cè)群（NSP）細(xì)胞2亞群。實(shí)驗(yàn)分組：SP組與NSP組。細(xì)胞生長(zhǎng)曲線法和平板克隆法比較SP細(xì)胞和NSP細(xì)胞的增殖能力和克隆形成能力；RT-PCR法檢測(cè)SP細(xì)胞和NSP細(xì)胞的CD133、三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)動(dòng)蛋白G2（ABCG2）表達(dá)；流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞凋亡率；無血清培養(yǎng)法檢測(cè)SP細(xì)胞及NSP細(xì)胞成球率；非肥胖糖尿病/嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（NOD/SCID）小鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)比較SP細(xì)胞和NSP細(xì)胞的致瘤性。
Bel-7402細(xì)胞中分選出的SP細(xì)胞比例為（2.4±0.0）%。生長(zhǎng)曲線表明SP細(xì)胞的增殖速度快于NSP細(xì)胞（P<0.05）。SP、NSP細(xì)胞的克隆形成率分別為（20.5±2.6）%、（5.1±0.9）%，兩者差異明顯（P<0.05）。SP細(xì)胞ABCG2 mRNA和CD133 mRNA平均表達(dá)水平分別是NSP細(xì)胞的3.03倍（P<0.01）和1.98倍（P<0.01）。SP細(xì)胞凋亡率為（0.89±0.23）%，低于NSP細(xì)胞（P<0.05）。在無血清培養(yǎng)基中，SP細(xì)胞成球率為（14.1±1.9）%，高于NSP細(xì)胞（P<0.05）。1×103、104、105數(shù)量的SP細(xì)胞形成皮下移植瘤（P>0.05，P<0.05，P<0.05），而1×105NSP細(xì)胞則還不能成瘤。
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