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      生物知識

      ELISA常見問題及處理對策

      作者: 來源: 發(fā)布時(shí)間: 2009-12-29 15:38  瀏覽次數(shù):
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      可能原因

      解決方法

      洗滌操作不規(guī)范
      洗板不充分,使用手工洗板常出現(xiàn)。最好使用洗板機(jī),或使用洗瓶洗滌。在兩次洗板之間加30秒的浸泡。
      實(shí)驗(yàn)中孵育溫度和時(shí)間不恰當(dāng)

      確定每一實(shí)驗(yàn)步驟的孵育溫度和時(shí)間是否適當(dāng)。

      酶加量過多 加酶前驗(yàn)看移液器調(diào)節(jié)量是否準(zhǔn)確。檢查稀釋度,若必要進(jìn)行效價(jià)測定。
      封閉不完全
      檢查封閉液的計(jì)算量,提高封閉時(shí)間。
      標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品的干擾物質(zhì) 做適當(dāng)?shù)膶φ铡?/FONT>
      顯色劑受光照時(shí)間較長或污染 顯色劑A和B應(yīng)于使用前10分鐘從冰箱取出。
      整批樣品放置時(shí)間過長樣品污染
      樣品應(yīng)保持新鮮,或低溫保存防止污染。
      緩沖液污染
      制備新鮮的緩沖液。
      吸頭重復(fù)使用未洗凈或消毒不完全而用于加酶或顯色劑
      吸頭盡可能一次性使用。

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