牛精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處理，保存在超低溫下，以達(dá)到長期保存的目的。通常采用液氮（-196℃）和干冰（-79℃）保存。其最大優(yōu)點(diǎn)是可長期保存，使用不受時(shí)間、地域以及種用雄性動(dòng)物壽命的限制。可充分提高公牛的利用率。現(xiàn)將冷凍精液的保存和怎樣進(jìn)行解凍及給母牛輸精的有關(guān)技術(shù)操作介紹如下，供參考。
稀釋液的配方
12％的蔗糖液75毫升、甘油5毫升、卵黃液20毫升。
稀釋方法
將經(jīng)過檢查合格的精液按1∶2倍~5倍稀釋液進(jìn)行稀釋，其稀釋原則應(yīng)保證每個(gè)顆粒精液中所含精子數(shù)不少于3000萬個(gè)~4000萬個(gè)，解凍后呈直線前進(jìn)運(yùn)行的精子不少于1500萬個(gè)。
冷凍
在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng)，距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng)，滴完最后一滴停3分鐘~5分鐘，當(dāng)精液顆粒顏色變白時(shí)，立即浸入液氮，并將全部顆粒取下，收集于儲(chǔ)精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi)，并做好標(biāo)記，然后立即移入液氮罐中儲(chǔ)存。
解凍
將預(yù)先配制好的9％檸檬酸的溶液1毫升，放入干凈的小試管中，再置于40℃左右的溫水杯中，迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動(dòng)至化凍時(shí)，從水杯中取出試管，接著檢查精液活力，即為合格品。
重視保精、快速解凍與鏡檢
1.根據(jù)液氮罐的性能要求，定期添加液氮，罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。
2.取精時(shí)，盡可能用長鑷子，切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處（罐頂10厘米左右）。
3.從液氮中取出細(xì)管凍精時(shí)，要輕輕甩一兩下，將塑料細(xì)管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中，把封口端留在水外3厘米外，待管內(nèi)精液融化一半時(shí)，立即取出備用。
4.解凍后的精液鏡檢時(shí)，精子的活力不低于標(biāo)準(zhǔn)方可用于輸精，才能確保正常受精。
5.解凍后的精液應(yīng)立即輸配，不宜停放時(shí)間過長，應(yīng)做到現(xiàn)解凍，現(xiàn)輸精。
適時(shí)輸精
母牛正常排卵是在發(fā)情結(jié)束后6小時(shí)~12小時(shí)，精子在母牛生殖道的存活時(shí)間為12小時(shí)~20小時(shí)，且還需要4小時(shí)~6小時(shí)的獲能過程，才能與卵子結(jié)合受精。精子15分鐘就會(huì)到達(dá)輸卵管受精部位，因此，讓精子早于卵子到達(dá)輸卵管受精部位是提高受胎率的先決條件。
1.適宜的輸精時(shí)間：在母牛的發(fā)情后期。此時(shí)母牛表現(xiàn)精神平穩(wěn)，外陰部腫脹消失，陰道不再流出透明液體。直腸檢查卵泡脹大，表面緊張，有一觸即破之感，此時(shí)為最佳輸精時(shí)間。
2.適宜的輸精部位：在子宮頸內(nèi)口1厘米處即子宮體基部，過淺易導(dǎo)致精液外流，過深易損傷子宮內(nèi)黏膜。
3.適宜的輸精方法：直腸把握子宮頸輸精法。將母牛保定，左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸后端，右手將輸精器自陰門向斜上方緩慢插入5厘米~10厘米（以避開尿道口）再改為平插送到子宮頸口，緩慢越過子宮頸管中的皺壁，到達(dá)子宮頸基部，慢慢注入精液后，緩緩抽出輸精器。
4.適宜的輸精次數(shù)：以1次~2次為宜?？稍诎l(fā)情母牛發(fā)情高潮后，黃牛在發(fā)情高潮后6小時(shí)~12小時(shí)，水牛在發(fā)情高潮后18小時(shí)~20小時(shí)進(jìn)行第一次輸精，前后間隔8小時(shí)~12小時(shí)再進(jìn)行第二次輸精。
程序降溫儀 網(wǎng)址鏈接 http://www.kjhfd.cn/a/gb2312/yiqi/CryoLogic/2013/0904/5082.html
胚胎冷凍儀 網(wǎng)址鏈接 http://www.kjhfd.cn/a/gb2312/yiqi/CryoLogic/2010/0428/3073.html |
