LONZA鱟試劑資料http://www.kjhfd.cn/a/gb2312/product/lonza/2010/0928/3762.html
新的2010版《----操作規(guī)程》明確了每3個(gè)月做一次內(nèi)毒素檢測(cè)。各位院感人都有建立和熟悉內(nèi)毒素檢測(cè)方法的過(guò)程。過(guò)去凡是醫(yī)院藥劑科制備滅菌制劑的，對(duì)內(nèi)毒素檢測(cè)并不陌生。但對(duì)于來(lái)自不同行業(yè)的院感人，可能有些茫然，不知道如何下手。許多人咨詢(xún)我，內(nèi)毒素檢測(cè)，怎么做？誰(shuí)來(lái)做？需要什么儀器設(shè)備？試劑怎么買(mǎi)？等等疑問(wèn)接踵而至。我建議大家去藥劑科咨詢(xún)，有條件看些相關(guān)資料。下面，就相關(guān)問(wèn)題逐一總結(jié)上傳，供初入門(mén)的人員參考。
如何去選擇鱟試劑和內(nèi)毒素檢測(cè)方法？
-內(nèi)毒素檢測(cè)新手必看
顯色基質(zhì)鱟試劑、凝膠法鱟試劑、特異性鱟試劑、動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑、比色法鱟試劑、顯色法鱟試劑、動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑、濁度法鱟試劑、動(dòng)態(tài)比濁法鱟試劑、棄G因子鱟試劑、終點(diǎn)顯色法鱟試劑...。如果你是一位剛準(zhǔn)備做內(nèi)毒素檢測(cè)的工作人員，看到有這么多種鱟試劑，是不是有個(gè)疑問(wèn)：“這么多種鱟試劑，我該怎么選擇呢？”別急，不要被這么多名字嚇到了，以下為您詳細(xì)分類(lèi)介紹：
一、什么是鱟試劑。
鱟試劑是從棲生于海洋的節(jié)肢動(dòng)物“鱟”的蘭色血液中提取變形細(xì)胞溶解物，經(jīng)低溫冷凍干燥而成的生物試劑，專(zhuān)用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)。
二、鱟試劑的分類(lèi)：
1、按原料來(lái)源分：
全世界有5個(gè)種屬的鱟，其中僅有中國(guó)鱟(又名三刺鱟）Tachypleus tridentatus Leach和美洲鱟 Limulus polyphemus Linnaeus可制造鱟試劑，對(duì)應(yīng)生產(chǎn)出來(lái)的鱟試劑分別為中國(guó)鱟鱟試劑（Tachypleus Amebocyte Lysate），縮寫(xiě)為TAL；美洲鱟鱟試劑（Limulus Amebocyte Lysate），縮寫(xiě)為LAL。TAL與LAL有相同的功效。
2、按檢測(cè)方法分：
中國(guó)藥典2005年版中收錄了2種細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，即凝膠法和光度測(cè)定法，后者包括濁度法和顯色基質(zhì)法。供試品檢測(cè)時(shí)，可使用其中任何一種方法進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)測(cè)定結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，除另有規(guī)定外，以凝膠法結(jié)果為準(zhǔn)。
三、鱟試驗(yàn)的內(nèi)毒素檢查方法
細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法詳見(jiàn)05年中國(guó)藥典附錄?！菊搲瘍?nèi)有相關(guān)介紹，請(qǐng)搜索】。
四、內(nèi)毒素的檢測(cè)原理：
1、凝膠法：系通過(guò)鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來(lái)定性檢測(cè)或半定量?jī)?nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見(jiàn)規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量，使用時(shí)應(yīng)加無(wú)熱原水（細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水）復(fù)溶后使用。2005年版藥典中凝膠法鱟試劑結(jié)果的判斷：保溫60分鐘±2分鐘后觀(guān)察結(jié)果。部分商家所說(shuō)的半小時(shí)出結(jié)果的快速凝膠法鱟試劑是沒(méi)有依據(jù)的，沒(méi)到時(shí)間就觀(guān)察結(jié)果可能導(dǎo)致假陰性。特異性鱟試劑（又叫棄G因子鱟試劑）是凝膠法鱟試劑的一種，細(xì)菌內(nèi)毒素及β-葡聚糖均能與鱟試劑發(fā)生凝聚反應(yīng)。特異性鱟試劑就是屏蔽β-葡聚糖引起的鱟試劑凝聚反應(yīng)，使鱟試劑僅與內(nèi)毒素起反應(yīng)。一般中草藥注射液成份復(fù)雜，干擾因素較多，常含有β-葡聚糖或內(nèi)毒素類(lèi)似物。用特異性鱟試劑能減少或消除假陽(yáng)性反應(yīng)。（應(yīng)做對(duì)比及干擾試驗(yàn)）。
2、光度測(cè)定法：
光度測(cè)定法又分為濁度法和顯色基質(zhì)法，這2種方法都是定量檢測(cè)內(nèi)毒素的方法。
濁度法系利用檢測(cè)鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過(guò)程過(guò)程中的濁度變化而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法。根據(jù)檢測(cè)原理，可分為終點(diǎn)濁度法和動(dòng)態(tài)濁度法。終點(diǎn)濁度法未見(jiàn)已商品化產(chǎn)品，不再贅述。動(dòng)態(tài)濁度（比濁）法是檢測(cè)反應(yīng)混合物的濁度到達(dá)某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時(shí)間，或是檢測(cè)濁度增加速度的方法。
顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法，因使用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀器，又稱(chēng)為比色法。根據(jù)檢測(cè)原理，分為終點(diǎn)顯色法和動(dòng)態(tài)顯色法。國(guó)內(nèi)已有顯色基質(zhì)鱟試劑盒(終點(diǎn)法)，早期有上海伊華以鱟三肽為原料做成的鱟試劑盒，廈門(mén)鱟試劑廠(chǎng)于2005推出以鱟四肽為原料的鱟試劑盒，也有少量國(guó)外產(chǎn)品，但到貨周期長(zhǎng)，價(jià)格遠(yuǎn)高于國(guó)產(chǎn)試劑。動(dòng)態(tài)比色法與終點(diǎn)比色基本原理差不多。國(guó)產(chǎn)暫無(wú)動(dòng)態(tài)比色法，相信很快就會(huì)面市。
五、方法與試劑選擇：
如果您僅需要檢測(cè)樣品的內(nèi)毒素限量，則應(yīng)選擇凝膠法鱟試劑，通過(guò)確定內(nèi)毒素限值及最大有效稀釋倍數(shù)，做樣品的干擾試驗(yàn)從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。
如果您需要定量測(cè)定樣品中內(nèi)毒素含量則應(yīng)選擇顯色基質(zhì)鱟試劑或動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑。動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑一般需要配備專(zhuān)用的動(dòng)態(tài)濁度儀或帶有特定軟件的酶標(biāo)儀，比較適合樣品量較多的用戶(hù)。（顯色基質(zhì)鱟試劑用酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)檢測(cè)。是樣品數(shù)較少（少于200-300個(gè)），設(shè)備比較簡(jiǎn)陋的用戶(hù)。如果已有內(nèi)毒素檢測(cè)專(zhuān)用酶標(biāo)儀，則可選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑。
最后小結(jié)：鱟試劑就分定性和定量2種，定性就選凝膠法（特殊產(chǎn)品用特異性鱟試劑）。定量就是顯色法鱟試劑盒或動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑（根據(jù)已有儀器條件來(lái)定）。如果有動(dòng)態(tài)比色法鱟試劑那就多一種選擇（當(dāng)然要看你的投入成本）。
相信通過(guò)以上介紹您對(duì)鱟試劑已經(jīng)有一定了解，聰明的你一定知道如何去選擇鱟試劑了吧！
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